Post by alamin4470 on Aug 13, 2023 3:40:20 GMT -7
显微镜 组织取自安乐死后 2 日龄双 KO 仔猪。制备肝、片。使用两个月大的野生型和8个月大的GGTA1-KO猪组织进行比较。将安装的组织在 HBSS 中的 Odyssey 封闭缓冲液（LI-Cor Biosciences，Lincoln，NE，USA）中封闭 1 小时。然后将载玻片固定在 4% 多聚甲醛中 10 分钟。组织用 IB4 凝集素 Alexa Fluor 647 (Invitrogen) 染色以可视化 Gal 表位的存在，并用鸡抗 N
eu5Gc 抗体 (Sialix) 或对照抗体 (Sialix) 染色 1 小电话号码列表表时，然后进行 3 次 HBSS 洗涤和驴抗鸡 DyLight 649（杰克逊免疫研究实验室公司）。将组织与二抗孵育约1小时，然后用0.1% HBSS Tween洗涤3次。将 DAPI (Invitrogen) 添加到所有载玻片中 1 分钟作为核染色剂，然后进行两次 0.1% HBSS Tween 洗涤。将组织封固在 ProLong Gol
d (Invitrogen) 中。使用 Olympus FV1000（Olympus America Inc.，Center Valley，PA，USA）进行共焦显微镜检查。 人抗体与 GGTA1-KO 和双 KO PBMC 结合 使用 Ficoll-Paque Plus 从 ACD 中收集的全血制备猪 PBMC。使用台盼蓝在显微镜下评估细胞活力。将约2x10 6 /ml GGTA1-KO和双KO PBMC与来自10名健康人类志愿者的25%热灭活血清混合。将PBMC与人血清在